جامع ترین فایل اصول طراحی پرایمر

دانشجویان و کاربران گرامی ، محتوای این فایل جامع ترین فایل اصول طراحی پرایمر با فرمت PPT در ۲۸ اسلاید می باشد .امیدواریم که سودمند بوده و مورد استفاده شما سروران گرامی واقع گردد. در صورت تمایل و نیاز می توانید این فایل ارزشمند و مفید را از وب سایت سن فایل با مناسب ترین قیمت خریداری و دانلود نمایید.

تعریف PCR :

(دستگاه کپی DNA)با استفاده از اجزای همانند سازی طبیعی DNA ، در داخل لوله آزمایش، DNA را تکثیر مینماید.

تعریف پرایمر از دیدگاه بیوشیمی

پرایمر قطعه رشته ای مکمل با قالب یک گروه -۳′هیدروکسیل آزاد می باشد که یک نوکلئوتید می تواند به آن اضافه گردد.انتهای ۳′ پرایمر را انتهای پرایمری گویند. به عبارتی دیگر لازم است قسمتی از زنجیر جدید از ابتدا در محل باشد.

تمامی  DNA پلیمرازها تنها می توانند  نوکلئوتیدها را به رشته ای اضافه نمایند که از قبل موجود است.

پرایمرها اغلب الیگونوکلئوتیدهای RNA و نه DNA هستند که در محل و زمان مورد نیاز توسط آنزیم های اختصاصی سنتز می شوند.

تفاوتهای پرایمر مورد استفاده در PCR

پرایمرها در واکنش زنجیره ای پلیمراز در واقع رشته های کوچک اختصاصی از یک DNA تک رشته ای (ssDNA) هستند که الیگومر نیز نامیده می شوند.

این آغازگرها به سمت نقطه مکمل خود در DNA تک رشته ای شده رفته و به آن متصل می گردد.

دوازده نکته مهم در طراحی پرایمر

.۱طول یک پرایمر وطول نهایی قطعه

.۲تعیین دمای ذوب

.۳میزان G+C

.۴دمای اتصال آغازگر (Ta)

.۵دمای اتصال آغازگر بهتر است بین ۵۵-۶۵ درجه سانتیگراد باشد.

.۶حضور باز G  و C برای افزایش میزان عملکرد

.۷ساختمان ثانویه(ساختمان سنجاق سری،دایمر داخلی،کراس دیمر)

ادامه مطلب